Stabilitas Natrium Fenitoin dalam Sampel Plasma Manusia menggunakan Ultra High Performance Liquid Chromatography (UHPLC) DAD

Abstract

Latar belakang: Natrium fenitoin merupakan obat dengan indeks terapeutik sempit, sehingga memerlukan pemantauan kadar dalam darah secara ketat. Uji stabilitas penting dilakukan untuk menjaga efektivitas obat secara akurat untuk mengoptimalkan pengobatan dalam TDM. Meskipun beberapa penelitian sebelumnya telah mengevaluasi stabilitas natrium fenitoin, data parameter lengkap stabilitasnya masih terbatas.

Tujuan: Mengevaluasi stabilitas natrium fenitoin dalam larutan stok, spiked- plasma auto-sampler, bench-top, pasca preparasi, freeze-thaw, long-term

Metode: Analisis dilakukan menggunakan metode UHPLC-DAD, fase gerak buffer fosfat pH 4 dan asetonitril (60:40 v/v), kolom C18 (250 mm × 4,6 mm; 5 μm). Uji stabilitas natrium fenitoin dilakukan dengan menyimpan spiked plasma pada berbagai kondisi suhu dan waktu berdasarkan pedoman Guidance for Industry: Bioanalytical Method Validation oleh FDA tahun 2018. Hasil: Hasil uji stabilitas pada parameter autosampler, bench-top (6 jam), processed sample, long-term, dan larutan stok menunjukkan nilai %difference dan %CV < 15%, sesuai dengan kriteria FDA 2018. Namun, kestabilan pada bench-top selama 24 jam dan setelah tiga siklus freeze-thaw belum dapat ditentukan secara valid akibat ketidakstabilan standar internal yang mengalami penurunan kadar >50% pada suhu ruang setelah 24 jam yang terjadi akibat degradasi enzimatis. Kesimpulan: Natrium fenitoin terbukti stabil pada sebagian besar parameter uji stabilitas, namun memerlukan evaluasi lebih lanjut terhadap kestabilan standar internal pada suhu ruang selama 24 jam.