FREKUENSI VARIAN rs1051740 T337C GEN EPHX1 PENYANDI ENZIM PEMETABOLISME CARBAMAZEPINE PADA RELAWAN SEHAT LAKI-LAKI SUKU JAWA DI PROVINSI DAERAH ISTIMEWA YOGYAKARTA

Abstract

Epilepsi adalah salah satu penyakit kronik berupa gangguan saraf yang lebih banyak dialami oleh laki-laki di Asia. Carbamazepine (CBZ) merupakan salah satu antiepilepsi yang digunakan sebagai terapi lini pertama dalam beberapa tipe kasus epilepsi yang memiliki indeks terapetik sempit. Enzim microsomal Epoxide Hydrolase (mEH) yang disandi oleh gen Epoxide Hydrolase 1 (EPHX1) sebagai enzim pemetabolisme CBZ dilaporkan memiliki sifat polimorfik yang dapat menyebabkan penurunan metabolit aktif CBZ. Penelitian ini ditujukan untuk mengetahui varian gen EPHX1 rs1051740 T337C di Indonesia khususnya pada relawan sehat laki-laki Suku Jawa sebagai suku terbesar di Indonesia. Analisis variasi genetik dilakukan dengan menggunakan metode PCR-RFLP. Desain primer PCR yang digunakan yaitu 5’–GATAAGTTCCGTTTCACCC–3’ sebagai primer forward dan 5’–TGTTCCTGCCTAGCTCTAA–3’ sebagai primer reverse. Kondisi PCR yaitu denaturasi awal suhu 94°C selama 3 menit dilanjutkan 32 siklus denaturasi pada suhu 94°C selama 30 detik, annealing suhu 55°C selama 25 detik dan extension suhu 72°C selama 1 menit dan final extension suhu 72°C selama 5 menit. Enzim restriksi yang digunakan adalah EcoRV dengan hasil pemotongan 136bp dan 232bp untuk varian TT (wildtype). Frekuensi varian gen EPHX1 rs1051740 T337C belum dapat diketahui dalam penelitian ini. Enzim restriksi gagal untuk memotong sekuen target yang dibuktikan dengan perolehan hasil yang berbeda dari metode direct requencing pada tiga sampel acak.