Verifikasi Metode dan Estimasi Ketidakpastian Analisis Asesulfam-K dan Aspartam secara Simultan pada Produk Pangan dengan Metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)

Abstract

Metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) merupakan metode yang direkomendasikan oleh British Standard (BS EN) untuk menganalisis asesulfam-K dan aspartam dalam produk pangan karena memiliki daya pemisahan yang baik, sensitif dan memiliki penyiapan sampel yang sederhana. Verifikasi metode perlu dilakukan untuk dapat memastikan bahwa metode tersebut sesuai dengan tujuan pemakaiannya dan dapat memberikan hasil yang valid serta estimasi ketidakpastian analisi untuk menetapkan rentang kadar yang dikuantitasi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kesesuaian nilai parameter verifikasi metode analisis asesulfam-K dan aspartam dengan KCKT yang memenuhi persyaratan AOAC (Association of Official Analytical Chemist) dan mengetahui nilai ketidakpastian analisis metode tersebut. Sistem kromatografi menggunakan pemisahan fase terbalik (reversed phase), kolom C18 (300 mm x 3,9 mm) kecepatan alir 1 mL/menit, fase gerak buffer fosfat:asetonitril (80:20), detector UV- Vis dengan panjang gelombang 220 nm. Hasil Linieritas kurva baku untuk masing- masing pemanis menunjukkan nilai yang baik (r > 0,99). Hasil uji spesifisitas menunjukkan waktu retensi yang hampir sama antara standar, campuran standar, dan sampel pada asesulfam-K dan aspartam muncul pada Rt yang sama yaitu 3,600 dan 6,522. Metode analisis yang digunakan menunjukkan presisi, akurasi, dan recovery yang baik, ditunjukkan dengan nilai simpangan baku relatif yang dihasilkan untuk masing-masing asesulfam-K dan aspartam adalah 0,56% dan 0,94% dengan %RSD Horwitz masing-masing 1,16% dan 1,03%, hasil dari persen akurasi 100,30% untuk asesulfam-K dan 100,28% untuk aspartam, sedangkan hasil persen recovery asesulfam-K berada pada rentang 94,86-106,22% dan aspartame pada rentang 98,51-101,76%. Uji kekuatan menunjukkan adanya perubahan konsentrasi pada asesulfam-K akibat perubahan pH dapar fosfat. Verifikasi metode analisis asesulfam-K dan aspartam memenuhi persyaratan AOAC. Hasil kadar dengan Nilai ketidakpastian yang didapatkan kurang dari 5% dari rata-rata kadar sampel produk pangan untuk asesulfam-K sebesar (x̅ ± U) 2018,19 ± 83,62739 mg/kg, sedangkan untuk aspartam sebesar (x̅ ± U) 4362,28 ± 69,37350 mg/kg.