Validasi Metode Bioanalisis Vankomisin Hidroklorida dalam Sampel Plasma Manusia menggunakan UHPLC-DAD

Abstract

Latar belakang: Vankomisin hidroklorida merupakan antibiotik indeks terapeutik sempit dan risiko nefrotoksisitas, sehingga memerlukan pemantauan kadar obat dalam darah (PKOD). Metode kromatografi cair dalam penelitian sebelumnya menunjukkan validitas yang baik, namun prosedur preparasi sampel dan teknik elusi gradien memiliki keterbatasan, terutama hal reprodusibilitas dan kebutuhan kinerja instrumen yang tinggi. Tujuan: Penelitian ini bertujuan memvalidasi metode bioanalisis vankomisin dengan prosedur preparasi lebih efisien serta teknik elusi isokratik sebagai alternatif sederhana. Metode: Analisis dilakukan menggunakan instrumen UHPLC-DAD. Fase gerak campuran buffer fosfat pH 4 dan asetonitril (75:25) SLS 0,2 mM, fase diam C18, λ 215 nm. Hasil validasi dievaluasi berdasarkan kriteria US Food and Drug Administration (FDA) tahun 2018. Hasil: Metode menunjukkan kurva kalibrasi linier pada rentang konsentrasi 0–60 μg/mL (r = 0,9996) dengan LLOQ sebesar 2,5 μg/mL. Akurasi dan presisi didapatkan hasil %diff dan %CV ≤20% pada LLOQ serta ≤15% pada QCL, QCM, dan QCH. Rerata %recovery mencapai 88,46%. Metode ini bersifat selektif tanpa adanya interferensi pada waktu retensi analit, tidak menunjukkan efek carryover, memiliki stabilitas yang baik. Kromatogram sampel pasien menunjukkan profil yang serupa dengan hasil validasi. Kesimpulan: Metode UHPLC-DAD yang divalidasi memenuhi kriteria FDA 2018 dan layak digunakan dalam studi farmakokinetik serta pemantauan kadar vankomisin dalam plasma darah.